消毒后內(nèi)鏡的微生物監(jiān)測需從采樣時間、采樣方法、檢測方法、結(jié)果判定四個核心環(huán)節(jié)嚴(yán)格把控,具體流程及要點如下:
一、采樣時間
必須在消毒后、使用前進(jìn)行采樣,避免儲存或操作環(huán)節(jié)的污染。若懷疑醫(yī)院感染與內(nèi)鏡診療操作相關(guān),需立即采樣檢測致病性微生物。
二、采樣方法
根據(jù)內(nèi)鏡類型(如胃鏡、腸鏡、支氣管鏡等)及結(jié)構(gòu)特點,選擇以下方法之一:
濾膜法(推薦方法)
操作:用無菌注射器抽取50ml含中和劑的洗脫液(如磷酸鹽緩沖液),從活檢口注入沖洗內(nèi)鏡管路,全量收集洗脫液送檢。將洗脫液充分混勻后,取1ml接種平皿,剩余液體用內(nèi)鏡微生物檢測儀濾膜過濾濃縮,將濾膜接種于營養(yǎng)瓊脂平板上培養(yǎng)。
適用場景:管腔內(nèi)壁微生物檢測,如十二指腸鏡、胃鏡等。
優(yōu)勢:提高標(biāo)本菌群濃度,提升檢出率,尤其適用于低污染水平樣本。
棉拭子涂抹法
操作:用浸有含中和劑的無菌棉拭子,從鏡頭至鏡身反復(fù)涂擦,同時轉(zhuǎn)動棉拭子,剪去手接觸部位后投入5ml含中和劑的生理鹽水試管中送檢。
適用場景:內(nèi)鏡外表面或活檢通道開口處微生物檢測。

三、檢測方法
培養(yǎng)條件
將接種后的平皿置于36℃±1℃恒溫箱中培養(yǎng)48小時,觀察菌落形態(tài)。
計數(shù)規(guī)則
濾膜法可計數(shù)時:菌落總數(shù)(CFU/件)= 平行平板平均菌落數(shù)(m) + 濾膜菌落數(shù)(mf)。
濾膜法不可計數(shù)時:菌落總數(shù)(CFU/件)= 平行平板平均菌落數(shù)(m) × 50(稀釋倍數(shù))。
示例:若平行平板菌落數(shù)為102和80,濾膜菌落數(shù)為20,則總菌落數(shù) = (102+80)/2 + 20 = 111 CFU/件。
四、結(jié)果判定
根據(jù)《軟式內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)規(guī)范》(WS 507-2016)及《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB 15982-2012):
消毒后內(nèi)鏡:細(xì)菌菌落總數(shù) ≤ 20 CFU/件。
滅菌后內(nèi)鏡:無菌生長(即未檢出任何微生物)。
不合格處理:若檢測結(jié)果超標(biāo),需立即重新清洗、消毒或滅菌,直至合格后方可使用。

五、監(jiān)測頻率與抽檢規(guī)則
消毒內(nèi)鏡:每季度至少進(jìn)行1次生物學(xué)監(jiān)測。
滅菌內(nèi)鏡:每月至少進(jìn)行1次生物學(xué)監(jiān)測。
抽檢比例:
內(nèi)鏡數(shù)量 ≤ 5條時,每次全部監(jiān)測;
內(nèi)鏡數(shù)量 > 5條時,每次抽檢數(shù)量 ≥ 5條(或按25%比例輪換抽檢)。
六、關(guān)鍵注意事項
中和劑選擇:根據(jù)消毒劑類型(如戊二醛、過氧乙酸)選擇對應(yīng)中和劑,確保消毒劑殘留被完全中和,避免影響檢測結(jié)果。
對照實驗:設(shè)置未清洗消毒的內(nèi)鏡作為對照,驗證清洗消毒流程的有效性。
設(shè)備維護(hù):定期檢查消毒設(shè)備性能(如清洗劑濃度、循環(huán)水質(zhì)量),確保設(shè)備正常運行。
儲存環(huán)境:內(nèi)鏡儲存柜需定期清潔消毒,柜內(nèi)空氣細(xì)菌菌落總數(shù) ≤ 4.0 CFU/(皿·5min),物體表面微生物數(shù)量 ≤ 10.0 CFU/cm2。
七、技術(shù)優(yōu)勢與推薦
濾膜法相比傳統(tǒng)傾注法,能更靈敏地檢測低污染水平樣本,減少假陰性風(fēng)險,推薦作為首選檢測方法。
自動化采樣設(shè)備(如微生物檢驗儀)可提升檢測效率,減少人為誤差,適合大型醫(yī)療機(jī)構(gòu)使用。
通過嚴(yán)格遵循上述流程,可確保內(nèi)鏡消毒效果符合標(biāo)準(zhǔn),有效預(yù)防交叉感染,保障患者醫(yī)療安全。







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